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    分享!液相色譜柱的再生和再生原則

    發布時間:2022-11-28   點擊次數:365次
      液相色譜柱基于熔融核技術,其性能超越傳統全孔5μm和3μm色譜柱,在不增加柱壓的情況下,實現快速高效分離,可作為傳統5μm色譜柱的新型標準柱。目前,液相色譜柱適用范圍廣,從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離,在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學,生藥學和天然產物化學,生物物質如多肽、蛋白、核酸等多個領域發揮重要作用。
     
      液相色譜柱再生:
      當液相色譜柱柱壓正常,但色譜圖異常時,首先更換保護柱重新進樣觀察色譜圖,若仍然異常則判斷為液相色譜柱柱效下降,需要進行再生步驟。柱效下降在色譜圖上主要表現為6種,分別為峰形加寬變形、峰形變粗、嚴重拖尾、出現肩峰、峰尖分叉(雙峰)及峰形畸變。這些異常往往導致無法準確定量,對數據的準確性造成影響。
     
      一般而言,前3種情形受到污染的情況比較輕微,經過再生即可大大提高柱效。出現第4種峰形一般是由于液相色譜柱受污染較為嚴重,如果是發生在初期,通過再生清洗也能夠恢復大部分柱效,如果長時間未進行處理,污染物與固定相已經牢固結合,則不能通過再生進行恢復,而只能通過清除被污染的固定相來進行修復了。出現第5種峰形一般是液相色譜柱柱頭塌陷所致。第6種情形是本應為單一的色譜峰卻畸變為多個色譜峰,這是污染非常嚴重造成的。柱頭塌陷和嚴重污染均不能通過再生恢復柱效,只能通過物理方法進行修復。
     
      再生原則如下:
      1、反相柱的再生:采用甲醇:水=95:5(V:V),純甲醇、二氯甲烷等溶劑作流動相,順次沖洗,每種流動相經液相色譜柱的量為20~30倍柱體積,然后再用相反順序沖洗液相色譜柱。
      2、正相柱的再生:順次用20~30倍柱體積的正己烷、異丙醇、二氯甲烷﹑甲醇作為流動相沖洗液相色譜柱,然后再以相反的順序沖洗液相色譜柱。由于異丙醇的黏度較大,沖洗時應將流速調到0.2mL/min,以免柱壓過大沖壞液相色譜柱。
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