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    美谷分子MD 細胞凋亡早期熒光檢測試劑盒

    更新時間:2022-05-13

    簡要描述:

    美谷分子MD 細胞凋亡早期熒光檢測試劑盒
    用于檢測細胞早期凋亡;一步法、均相檢測活細胞內 GSH 水平。

    型號:CMB0415934D點擊量:672

    美谷分子MD 細胞凋亡早期熒光檢測試劑盒

    用于檢測細胞早期凋亡;一步法、均相檢測活細胞內 GSH 水平。

    美谷分子MD 細胞凋亡早期熒光檢測試劑盒

    本試劑盒可使用熒光微孔讀板機來針對哺乳動物中活細胞的谷胱甘肽含量的測定,檢測早期細胞凋亡事件。谷胱甘肽是哺乳動物細胞中的一種重要抗氧化劑,由于谷胱甘肽流出,細胞內谷胱甘肽 (GSH) 減少導致早期發生的線粒體相關細胞凋亡。本試劑盒使用單氯二胺 (MCB) 檢測細胞凋亡事件中的細胞 GSH 水平,MCB 是一種具有 GSH 高親和性的細胞滲透性染料。未反應染料幾乎都是非熒光的。染料與 GSH 反應之后,通過內源性谷胱甘肽硫轉移酶 (GST) 催化,此染料為藍色熒光,其中激發波長 394nm,發射波長 490nm。檢測發出的熒光信號強度可反應細胞中 GSH 的含量

    早期細胞凋亡分析,測定細胞內氧化還原狀態的變化,用于胚胎發育、癌癥及神經退行性疾病等研究。

    試劑盒原理:Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中caspase-3為關鍵的執行分子,它在凋亡信號傳導的許多途徑中發揮功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞漿中,在凋亡的早期階段,它被激活?;罨腃aspase-3能夠特異切割底物DEVD-NucView 488。根據這一特點,Biotium 將一段帶有大量負電荷的DEVD肽連接到一種能和DNA結合的染料上。底物本身不能產生熒光,但是這種底物可以快速的穿過細胞膜進入細胞質并在這里被活化的Caspase-3剪切,從而釋放出和DNA有高親和力的染料,釋放出來的染料遷移進入細胞核并把細胞核染成亮綠色。根據釋放的熒光強度的大小,可以測定caspase-3的活性,從而反映Caspase-3被活化的程度。從這里我們可以得出:這個熒光底物不同于傳統的底物,它實現活細胞 Caspase-3 活性檢測的同時染色細胞核DNA,具有典型的雙功能性。線粒體跨膜電位的降低是細胞凋亡早期的不可逆事件,引起一系列線粒體相關變化。MitoViewTM 633是一種遠紅外線粒體熒光染料(一種親脂性陽離子化合物),在正常細胞中依據線粒體膜電位(外正內負)的存在,逐漸擴散進質膜并沉積在線粒體內,在激發光下放出熒光,可以非常方便地使用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡來觀察線粒體的形態和移動的變化情形。例如下圖,活的Hela細胞用MitoViewTM  633染色結果






     

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